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elisa试剂盒TSZ

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起批量 ≥1 瓶
最小起订1瓶
供货总量56瓶
发货地址上海市闵行区
建议售价¥600-3500/瓶
更新日期2022年01月21日
VIP4年
企业认证: 试剂
企业性质:私营独资企业
公司地址:上海嘉定区澄浏公路52号 中科院技术转移中心24号楼F6
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产地: 上海
品牌: 进口

原理:

采用双抗体夹心法测定人雄激素结合蛋白(ABP)水平。用纯化的人雄激素结合蛋白(ABP)抗体包被微孔板,制成固相载体,实验时依次在微孔板中加入样本及标准品,并加入 HRP 标记的 ABP 抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,反复洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,再用硫酸终止反应,转变成黄色。颜色的深浅和样品中的 ABP含量呈正相关。采用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度(OD 值),根据标准曲线,计算测试样品中 ABP 浓度。 

实验材料与试剂配制:

1. 仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。

2. 缓冲液使用:加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中,如果样品量不够或者不确定,缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。

混匀,静置1小时备用(如果标本是血清或者血浆,此步骤忽略)。

3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液备用。

样品收集、处理及保存

1. 细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。

2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104

-106

/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或

者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。

3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。

4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上

清。

5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。

6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000

rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。

7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

8. 保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤:

1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。

2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准

品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。

注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。

3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul

的待测样本。

4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。

5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。

6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。

7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。

8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。

9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。

注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的 30 分钟内,以免影响准确性。

注意事项:

1. 实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。

2. 加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与*一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。

3. 孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。

4. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。

5. 建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。

6. 建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商沟通,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。

安全性

1. 避免人体直接接触显色剂A、B和终止液。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要进食、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存:2-8℃

2.有效期:6个月


公司简介

上海莼试生物技术有限公司 Shanghai Chuntest Biotechnology Co. Ltd.专业经营生科研化试剂、分析试剂 , 代理 许多国际先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员;另一方面也非常重视自主产品研究和开发,推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时*对于生物行业的发展给予了极大的重视,更多地侧重于科研的投入。公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司的服务和业务 在同行获得一致好评。其立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,也具备丰富的管理经验,同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想,更有责任感,是您科研道路上值得信赖的伙伴。公司的理念是:以诚信为本,努力打造*品牌,为您提供全方位的售中、售后服务。

成立时间: 2016-02-19 企业经济性质: 私营独资企业 年营业额:
注册资金: 50万元(人民币) 经营模式: 生产商,代理商, 员工人数:
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