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phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体产品图片

phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体

  800
起批量 ≥1瓶
最小起订1瓶
供货总量100瓶
发货地址上海上海市
建议售价¥1600/瓶
更新日期2019年06月14日
 
企业认证: 试剂
注册资本:500000万元(人民币)
企业性质:私营有限责任公司
主营产品:ELISA试剂盒,ATCC细胞,抗体,值得信赖的高品
公司地址:上海市闵行区元江路5500号第1幢5658室
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品牌: yaji
产地: 上海
靶点:
浓度: 99 %
应用范围: 石蜡切片需做抗原修复
宿主: Rabbit
适应物种: 人大小鼠等
标识物:
克隆性:
保存条件: Store at -20 °C for one year
形态: 液态
亚型: IgG
免疫原: whole cell protein of Salmonella typhimurium O
货号: YS-17824R
抗体名:

中文名称:phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体

说明书:来电索取

规格:0.1ml  0.2ml

研究领域:科研

抗体来源:Rabbit

克隆类型:Polyclonal

交叉反应:Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, 

产品应用:WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

分子量:54kDa

性   状:Lyophilized or Liquid

浓   度:1mg/1ml

免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDHI

亚   型:IgG

纯化方法:affinity purified by Protein A

储存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存条件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体特异性:

●兔多克隆免疫球蛋白,亲和纯化的蛋白。

●反应:人类,老鼠,鼠,猪,兔子,。

●免疫原:KLH合成肽来源于人类ALDHI共轭。

●预测分子量:54 kda。储存:发货在4℃,储存在-20℃(避免重复冻结/解冻周期)。

伤寒沙门氏菌 Salmonella typhimurium   属于沙门氏菌B群。O抗原有1,4,5,12,H抗原单相为1,双相为1,2。它是引起食物中毒而发生炎症的有名的细菌,但通过P22噬菌体转导、溶原化变换以及组氨酸操纵子等性状出现的调节机制的分析,也成为了促进微生物遗传学发展的一种重要的细菌。


溶解方法

方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,*分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;

方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。

后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。

我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。

Antibodies are prepared with 0.01M PBS, pH 7.4 with 1% BSA and 0.1% Sodium Azide, prior to lyophilization. Currently, we offer both lyophilized and reconstituted antibodies, both resulting in final concentration of 1mg/mL. We recommend two ways to reconstitute antibodies in lyophilized form:

1) Reconstituting by directly adding 100uL of sterile, distilled water.

2) Alternatively, if glycerol does not affect the experiment, add 50uL sterile distilled water, followed by adding 50uL of glycerol.


phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体修复方法:

修复液:0.01M 枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)

方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;

方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。

Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)磷酸化二氢嘧啶酶样2抗体

CRMP4脑衰蛋白反应调节蛋白4抗体

CCDC87卷曲螺旋结构域蛋白87抗体

CHCHD8卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体

CCDC88B大脑亮氨酸拉链结构域蛋白抗体

CCDC93卷曲螺旋结构域蛋白93抗体

CHCHD5卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD5抗体

NPFF*痛觉调节肽NPFF抗体

Slc22a5溶质载体家族蛋白22成员5抗体

SNX27SNX27蛋白抗体

GMRP1糖代谢相关蛋白1抗体

FADD

ASMTY松果体N甲基乙酰羟色胺抗体

FAM50AFAM50A蛋白抗体

FAM134CFAM134C蛋白抗体

Histone H2A.Z组蛋白H2AZ抗体

GM130高尔基体自身蛋白GM130抗体

HCV NS* transactivated protein 8丙肝病毒NS*反转录蛋白8抗体

C9orf1159号染色体开放阅读框115抗体

BTBD6BTBD6蛋白抗体

RNF74环指蛋白74抗体(重组激活基因1)

RAG2重组激活基因2蛋白抗体

TRP12瞬时受体电位蛋白12抗体

UromodulinTH糖蛋白抗体

GNAO1G蛋白偶联受体结合蛋白O亚基A2抗体

IGSF9B免疫球蛋白超家族成员B抗体

CCNYL1周期素样Y1抗体

MOBKL2BMob1同源蛋白MOBKL2B抗体

phospho-NMDAR1 (Ser889),磷酸化谷氨酸受体1抗体酶标抗体效价测定程序

各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):

1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;

2、37°C包被60min或4°C过夜;

3、PBST洗板3次,5min/次;

4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;

5、37°C 30min;

6、PBST洗板5min/次×3;

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;

8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;

9、450nm 测定OD值;

10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。

公司简介

欢迎您访我们的网站,如有什么问题请给我们电话或留言,告诉我您的需要,并留下您宝贵的建议和意见。 我公司主营如下: 免疫组化试剂盒,Elisa试剂盒:大鼠Elisa试剂盒,小鼠Elisa试剂盒,人Elisa试剂盒,犬Elisa试剂盒,鱼Elisa试剂盒,鸡Elisa试剂盒,牛Elisa试剂盒、其他动物类Elisa试剂盒、植物Elisa试剂盒、分子生物学试剂盒、 免疫组化试剂盒、金标检测试剂盒、生化试剂盒、细胞凋亡试剂盒。 抗体:一抗、二抗、进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、单标抗体、双标抗体、多标抗体;免疫组化抗体、免疫细胞化学抗体、免疫荧光抗体、流式细胞抗体。抗体:一抗、二抗、进口原装抗体、进口分装抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、单标抗体、双标抗体、多标抗体;免疫组化抗体、免疫细胞化学抗体、免疫荧光抗体、流式细胞抗体。 动物血清:内皮细胞专用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。动物血清:内皮细胞专用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。 细胞:原装进口细胞、正常细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞。细胞:原装进口细胞、正常细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞。 欢迎新老客户前来咨询订购,我们将竭诚为您服务。 进入公司首页>

成立时间: 2011 企业经济性质: 私营有限责任公司 年营业额: 100万-250万
注册资金: 500000 经营模式: 生产商, 员工人数: 11-50
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猪伪狂犬病毒实时荧光PCR检测试剂盒 【产品名称】 通用名称: 猪 伪狂犬 病毒 实时荧光 PCR 检测试剂盒 英文名称 : Porcine Pseudorabies virus Detection Kit (Real-Time PCR Method) 【包装规格】 25 T / 盒 & 50 T / 盒 【预期用途】 猪 伪狂犬 病毒( Porcine Pseudorabies virus , P P r V )在分类学上属 疱疹 病毒科 猪疱疹病毒 属。本试剂盒利用实时荧光 PCR 原理,定性检测 P P R V , 对 P R V 引起的猪的疫病的诊断和监控具有重要指导意义。 【检验原理】 猪 伪狂犬 病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒 本试剂盒针对 P P R V 高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含 P P R V 基因组模板的情况下, PCR 反应得以进行并释放荧光信号。利用仪器对 PCR 过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。 【主要组成成份】 序号 组成 25 T / 盒 50 T / 盒 1 P P r V PCR 反应液 437.5 μL×1 管 875 μL×1 管 2 P P r V 混合酶液 62.5 μL×1 管 125 μL×1 管 3 P P r V 阳性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 4 P P r V 阴性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 5 说明书 1 份 1 份 注:阴性对照为 猪基因组 DNA ,阳性对照为 P P R V 经灭活处理的核酸提取物 。 【储存条件及有效期】 避光 -20 ℃ 以下保存,避免反复冻融,有效期 12 个月。 【适用仪器】 ABI 系列、 Bio-Rad 系列、 Agilent Stratagene MX 系列、 Roche LightCycler R480 、 Cepheid SmartCycler 、 Rotor-Gene 系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量 PCR 仪。 【样本要求】 猪 伪狂犬 病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒 1. 新鲜采集的咽拭子、鼻拭子标本,并使用灭菌生理盐水悬浮。 2. 患病动物的脑、心、肝、脾、肺、肾、扁桃体等 病理组织。 3. 标本收集后若不能立即检测,可置于 2 ~ 8℃ 冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应冻存于 -20℃ ~ -80℃ 。 4 . 标本保存期间应避免反复冻融。 【检验方法】 1. 试剂准备(试剂准备区) ( 1 )从冰箱中取出试剂盒 , 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。 ( 2 )核算当次实验所需要的反应数( n ),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。 n = 阴性对照数( 1T ) + 阳性对照数( 1T ) + 误差预留量( 1T ) + 样本数 单反液配制表 ( 每份 ) PCR 反应液 17.5 μL 混合酶液( Taq 酶 +UNG 酶) 2.5 μL (3) 在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照 20 μL/ 管分装量将试剂分装至 PCR 反应管。 (4) 盖紧 PCR 反应管盖后将 PCR 反应管转移至样本处理区。剩余试剂放回 -20 ℃ 以下冰箱冷冻保存。 2. 样本准备(样本处理区) 用 QIAGEN 、 Roche 公司 DNA 提取试剂盒提取 DNA ,具体操作按照其试剂盒说明书操作。 3. 加样 在上述制备好的 PCR 反应样本管中分别加入处理好的待测标本 DNA 各 5μl 、终体积 25μl/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加 5μL 试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品,终体积为 25μl/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。 4.PCR ( PCR 扩增区) ( 1 )取样本处理区准备好的 PCR 反应管,放置在实时荧光定量 PCR 仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。 ( 2 )按下表设置仪器核酸扩增相关参数进行 PCR 扩增。 猪 伪狂犬 病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒 反应体积 25 μL 通道选择 FAM 通道采集 P P r V 荧光信号 PCR 反应 条件 步骤 条件 循环数 UNG 处理 50 ℃ : 2 分钟( min ) 1 预变性 95 ℃ : 3 分钟( min ) 1 预扩增 95 ℃ : 5 秒( s ) 5 55 ℃ : 40 秒( s ) PCR 扩增 95 ℃ : 5 秒( s ) 40 55 ℃ : 40 秒( s ) (此阶段结束时采集荧光信号) 注: ABI 系列荧光 PCR 仪在设置时不选 ROX 校正,设置淬灭基团选择 None 。 【参考值(参考范围)】 1. 试剂盒有效性判定: ( 1 )阳性对照:有典型 S 型扩增曲线或 Ct 值 ≤35 。 ( 2 )阴性对照: Ct 值> 38 或无 Ct 值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。 2. 标本结果判定: ( 1 ) 阳性:标本检测结果 Ct 值 ≤35 或有明显指数增长期。 ( 2 )可疑: 标本检测结果 Ct 值在 35 ~ 38 范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果 Ct 值仍在 35 ~ 38 范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。 ( 3 )阴性:标本检测结果 Ct 值> 38 或无 Ct 值。 【检验结果的解释】 通道及检测结果 标本检测结果解释 FAM 阴性(-) 标本中未检出 P P r V 阳性(+) 标本中检测出 P P r V 【检验方法的局限性】 1. 当检测样本中被检核酸浓度含量低于本试剂盒的最低检出限时可能会发生假阴性的结果。 2. 本试剂盒仅供标本初步筛查使用,对于本试剂盒检测阳性结果应进一步使用培养法进行确诊。 【产品性能指标】 产品的最低检出限为 10 2 CFU ,产品 CV 值 ≤5% 。 【注意事项】 1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和 PCR 扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 每次实验应该设置阴、阳性对照。 3. 为保证试剂不受标本污染,必须将混合酶液及 PCR 反应液保存于试剂准备区。 4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。 5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。 6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触 PCR 反应管,并应避免在 PCR 反应管上进行任何标记。 7. 仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置; 不同批号试剂不能混用。 8. ABI 系列荧光定量 PCR 仪参数设置中不选 ROX 校正,淬灭基因选择 None 。 9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。 猪 伪狂犬 病毒实时荧光 PCR 检测试剂盒 查看详细∨
猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR试剂盒 猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR 试剂盒,更多PCR,欢迎来电咨询上海雅吉生物科技有限公司 【产品名称】 通用名 称: 猪流感病毒 H3N2 亚型RT-PCR 试剂盒 ( 双色 实时荧光 PCR 法) 英文名称 : Swine I nfluenza V irus H3N2 Detection Kit (Dual channels Real-Time PCR Method ) 【包装规格】 2 5 T / 盒 & 50 T / 盒 【预期用途】 本试剂盒利用 实时荧光 PCR 原理, 定性检测 猪流感病毒 ,对 猪流感病毒 引起的 流感及其并发症的 诊断及疗效评估有重要指导意义。 【检验原理】 本试剂盒针对 猪流感病毒 H3N2 的高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含 猪流感病毒 H3N2 基因组模板的情况下, PCR 反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量 PCR 仪对 PCR 过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。 【主要组成成份】 序号 组成 25 T / 盒 50 T / 盒 1 S IV-H 3 N 2 RT-PCR 反应液 375 μL×1 管 750 μL×1 管 2 SIV-H 3 N 2 逆转录酶 50 μL×1 管 100 μL×1 管 3 SIV-H 3 N 2 Taq 酶 75 μL×1 管 150 μL×1 管 4 SIV-H 3 N 2 阳性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 5 SIV-H 3 N 2 阴性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 6 说明书 1 份 1 份 注:阴性对照为 猪 基因组 DNA ,阳性对照为失去活性的 SIV - H3N2 病毒 cDN A 。 猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR 试剂盒 【储存条件及有效期】 避光 -20℃ 以下保存,避免反复冻融,有效期 12 个月。 【适用仪器】 ABI 系列、 Bio-Rad 系列、 Agilent Stratagene MX 系列 、 Roche LightCycler R480 、 Cepheid SmartCycler 、 Rotor-Gene 系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量 PCR 仪。 【样本要求】 1. 取咽喉拭子和鼻拭子,采集方法如下: (1) 咽喉拭子,采取时要将拭子深入喉头及上颚裂来回刮 3 次~ 5 次,取咽喉分泌液; (2) 鼻拭子,将拭子深入鼻腔及周围圈沾取分泌液; (3) 将咽喉拭子和鼻拭子一起放入有 1.0 mL 生理盐水的离心管中备用; (4) 理想情况下标本 应使用头部为合成纤维的拭子,用铝或塑料做杆。不推荐棉拭子和木杆。 2. 血液或血清样品:使用无菌注射液抽取样品置于离心管中待检。 3. 标本采集管应包含含有蛋白稳定剂的病毒运输液。 4. 应避免标本间交叉污染。 5. 标本收集后 可立即检测; 若不 能立即 检测, 可置于 2 ~ 8 ℃冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应 冻存于 - 8 0 ℃ 以下,避免反复冻融。 【检验方法】 1. 试剂准备(试剂准备区) ( 1 )从冰箱中取出试剂盒 , 从试剂盒中取出实验所需试剂 , 充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。 ( 2 )核算当次实验所需要的反应数( n ),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。 n = 阴性对照数( 1T ) + 阳性对照数( 1T ) + 误差预留量( 1T ) + 样本数 单反液配制表 ( 每人份 ) RT-PCR 反应液 15.0 μL 逆转录酶 2.0 μL Taq 酶 3.0 μL ( 3 ) 在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照 20 μL/ 管分装量将试剂分装至 PCR 反应管。 2. 样本准备(样本处理区) 用 QIAGEN 、 Roche 公司 RNA 提取试剂盒提取 RNA ,具体操作按照其试剂盒说明书操作。 3. 加样 在上述制备好的 PCR 反应样本管中分别加入处理好的待测标本 RNA 各 5 μl 、终体积 25 μl/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加 5 μL 试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品,终体积为 25 μl/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。 猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR 试剂盒 4. PCR ( PCR 扩增区) ( 1 )取样本处理区准备好的 PCR 反应管,放置在实时荧光定量 PCR 仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。 ( 2 )按下表设置仪器核酸扩增相关参数进行 PCR 扩增。 反应体积 25 μL 通道选择 FAM 通道采集 SIV-H 3 病毒荧光信号 HEX 通道采集 SIV-N 2 病毒荧光信号 PCR 反应 条件 步骤 条件 循环数 反转录 42℃ : 10 分钟( min ) 1 预变性 95℃ : 3 分钟( min ) 1 预扩增 95℃ : 5 秒( s ) 5 55℃ : 40 秒( s ) PCR 扩增 95℃ : 5 秒( s ) 40 55℃ : 40 秒( s ) (此阶段结束时采集荧光信号) 猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR 试剂盒 注: ABI 系列荧光 PCR 仪在设置时不选 ROX 校正,设置淬灭基团选择 None 。 【参考值(参考范围)】 1. 试剂盒有效性判定: ( 1 )阳性对照:有典型 S 型扩增曲线或 Ct 值 ≤35 。 ( 2 )阴性对照: Ct 值> 38 或无 Ct 值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。 2. 标本结果判定: ( 1 ) 阳性:标本检测结果 Ct 值 ≤35 或有明显指数增长期。 ( 2 )可疑: 标本检测结果 Ct 值在 35 ~ 38 范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果 Ct 值仍在 35 ~ 38 范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。 ( 3 )阴性:标本检测结果 Ct 值> 38 或无 Ct 值。 【检验结果的解释】 通道及检测结果 标本检测结果解释 FAM HEX 阳性(+) 阳性(+) 标本 中 检出 猪流感病毒 H 3 亚型、猪流感病毒 N 2 亚型 RNA 阳性(+) 阴性(-) 标本 中 检出 猪流感病毒 H 3 亚型 RNA ,未检出 猪流感病毒 N 2 亚型 RNA 阴性(-) 阳性(+) 标本 中 检出 猪流感病毒 N 2 亚型 RNA ,未检出 猪流感病毒 H 3 亚型 RNA 阴性(-) 阴性(-) 标本 中未 检出 猪流感病毒 H 3 亚型、猪流感病毒 N 2 亚型 RNA 【检验方法的局限性】 1. 当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的最低检出限时可能会发生假阴性的结果。 2. 被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成 RNA 降解而产生假阴性结果。 3. 样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染,则容易得到假阳性结果。 【产品性能指标】 产品的最低检出限为 10 2 Copies/mL ,产品 CV 值 ≤5% 。 【注意事项】 1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和 PCR 扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 为避免 RNA 降解,样本处理过程应在 0-4℃ 条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。 3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。 4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。 5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。 6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触 PCR 反应管,并应避免在 PCR 反应管上进行任何标记。 7. 仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置; 不同批号试剂不能混用。 8. ABI 系列荧光定量 PCR 仪参数设置中不选 ROX 校正,淬灭基因选择 None 。 9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。 猪流感病毒H3N2亚型RT-PCR 试剂盒 查看详细∨
猪流感病毒H1N2亚型RT-PCR试剂盒 【产品名称】 通用名 称: 猪流感病毒 H1N2 亚型RT-PCR试剂盒 (双色实时荧光 PCR 法) 英文名称 : Swine Influenza Virus H1N2 Detection Kit ( Dual channels Real-Time PCR Method) 【包装规格】 25 T / 盒 & 50 T / 盒 【预期用途】 本试剂盒利用 实时荧光 PCR 原理, 定性检测猪流感病毒,对猪流感病毒引起的 流感及其并发症的 诊断及疗效评估有重要指导意义。 【检验原理】 本试剂盒针对猪流感病毒 H1N2 基因高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含猪流感基因组模板的情况下, PCR 反应得以进行并释放荧光信号。利用仪器对 PCR 过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。 【主要组成成份】 序号 组成 25 T / 盒 50 T / 盒 1 S IV-H1N2 RT-PCR 反应液 375 μL×1 管 750 μL×1 管 2 SIV-H1N2 逆转录酶 50 μL×1 管 100 μL×1 管 3 SIV-H1N2 Taq 酶 75 μL×1 管 150 μL×1 管 4 SIV-H1N2 阳性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 5 SIV-H1N2 阴性对照 40 μL×1 管 40 μL×1 管 6 说明书 1 份 1 份 注:阴性对照为猪基因组 DNA ,阳性对照为失去活性的 猪流感病毒 H1N2 亚型 cDNA 。 猪流感病毒 H1N2 亚型RT-PCR试剂盒 【储存条件及有效期】 避光 -20 ℃ 以下保存,避免反复冻融,有效期 12 个月。 【适用仪器】 ABI 系列、 Bio-Rad 系列、 Agilent Stratagene MX 系列 、 Roche LightCycler R480 、 Cepheid SmartCycler 、 Rotor-Gene 系列、杭州博日系列等多通道实时荧光定量 PCR 仪。 【样本要求】 如使用原始标本进行检测,标本应新鲜采集并使用灭菌生理盐水悬浮原始标本。 应避免标本间交叉污染。 标本收集后若不能立即检测,可置于 2 ~ 8 ℃冷藏过夜保存;如需长期保存,标本应 冻存于 -80 ℃ ,避免反复冻融,长期保存不会影响本试剂盒检测结果,但有可能影响培养法检测结果的准确性。 【检验方法】 1. 试剂准备(试剂准备区) ( 1 )从冰箱中取出试剂盒 , 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。 ( 2 )核算当次实验所需要的反应数( n ),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。 n = 阴性对照数( 1T ) + 阳性对照数( 1T ) + 误差预留量( 1T ) + 样本数 单反液配制表 ( 每人份 ) RT-PCR 反应液 15.0 μL 逆转录酶 2.0 μL Taq 酶 3.0 μL (3) 在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照 20 μL/ 管分装量将试剂分装至 PCR 反应管。 2. 样本准备(样本处理区) 用 QIAGEN 、 Roche 公司 RNA 提取试剂盒提取 RNA ,具体操作按照其试剂盒说明书操作。 3. 加样 在上述制备好的 PCR 反应管中分别加入处理好的待测标本 RNA 各 5 μ l 、终体积 25 μ l/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。 根据需要,在上述准备好的 PCR 反应管中分别加入阴性对照品以及阳性对照品各 5 μ l ,终体积为 25 μ l/ 管,盖好 PCR 反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到 PCR 仪器上。 4.PCR ( PCR 扩增区) ( 1 )取样本处理区准备好的 PCR 反应管,放置在实时荧光定量 PCR 仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。 ( 2 )按下表设置仪器核酸扩增相关参数进行 PCR 扩增。 反应体积 25 μL 通道选择 FAM 通道采集猪流感病毒 H1 亚型荧光信号 HEX 通道采集猪流感病毒 N2 亚型荧光信号 PCR 反应 条件 步骤 条件 循环数 反转录 42℃ : 10 分钟( min ) 1 预变性 95℃ : 3 分钟( min ) 1 预扩增 95℃ : 5 秒( s ) 5 55℃ : 40 秒( s ) PCR 扩增 95℃ : 5 秒( s ) 40 55℃ : 40 秒( s ) (此阶段结束时采集荧光信号) 注: ABI 系列荧光 PCR 仪在设置时不选 ROX 校正,设置淬灭基团选择 None 。 猪流感病毒 H1N2 亚型RT-PCR试剂盒 【参考值(参考范围)】 1. 试剂盒有效性判定: ( 1 )阳性对照:有典型 S 型扩增曲线或 Ct 值 ≤35 。 ( 2 )阴性对照: Ct 值> 38 或无 Ct 值,线形为直线或轻微斜线,无指数增长期。 2. 标本结果判定: ( 1 ) 阳性:标本检测结果 Ct 值 ≤35 或有明显指数增长期。 ( 2 )可疑: 标本检测结果 Ct 值在 35 ~ 38 范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果 Ct 值仍在 35 ~ 38 范围内,有明显指数增长期,则判定为阳性,否则为阴性。 ( 3 )阴性:标本检测结果 Ct 值> 38 或无 Ct 值。 【检验结果的解释】 通道及检测结果 标本检测结果解释 FAM HEX 阳性(+) 阳性(+) 标本中检出猪流感病毒 H1 亚型、猪流感病毒 N2 亚型 RNA 阳性(+) 阴性(-) 标本中检出猪流感病毒 H1 亚型 RNA ,未检出猪流感病毒 N2 亚型 RNA 阴性(-) 阳性(+) 标本中检出猪流感病毒 N2 亚型 RNA ,未检出猪流感病毒 H1 亚型 RNA 阴性(-) 阴性(-) 标本中未检出猪流感病毒 H1 亚型、猪流感病毒 N2 亚型 RNA 【检验方法的局限性】 1. 当检测样本中被检核酸浓度低于本试剂盒的最低检出限时可能会发生假阴性的结果。 2. 被检样本在采集、运输、储存以及处理过程中操作方式不当容易造成 RNA 降解而产生假阴性结果。 3. 样本在采集、运输、储存以及处理过程中发生交叉污染,则容易得到假阳性结果。 【产品性能指标】 产品的最低检出限为 10 2 Copies/mL ,产品 CV 值 ≤5% 。 【注意事项】 1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和 PCR 扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。 2. 为避免 RNA 降解,样本处理过程应在 0-4℃ 条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。 3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。 4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。 5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。 6. 为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触 PCR 反应管,并应避免在 PCR 反应管上进行任何标记。 7. 仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置; 不同批号试剂不能混用。 8. ABI 系列荧光定量 PCR 仪参数设置中不选 ROX 校正,淬灭基因选择 None 。 9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。 猪流感病毒 H1N2 亚型RT-PCR试剂盒 查看详细∨
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